2026-03-06T20:49:37Z https://fukuyama-u.repo.nii.ac.jp/oai

oai:fukuyama-u.repo.nii.ac.jp:00007514 2023-06-19T10:41:40Z 502:506:662:667

脂肪酸ω酸化経路の確立 : 細胞質アルデヒドデヒドロゲナーゼの役割 A Role of Cytosolic Aldehyde Dehydrogenase in Fatty Acid ω-Oxidation Pathway 宮尾, 夕子 山本, 覚 脂肪酸 ω-酸化 アルデヒドデヒドロゲナーゼ fatty acid ω-oxidation aldehyde dehydrogenase P(論文) 脂肪酸の一部はω-酸化経路およびβ-酸化経路を経てより炭素鎖の少ないジカルボン酸に代謝される。脂肪酸ω-酸化経路は連続する3つの反応を触媒するω-水酸化酵素、アルコールデヒドロゲナーゼ、およびアルデヒドデヒドロゲナーゼで構成されているが、脂肪酸ω-酸化経路の観点からアルデヒドデヒドロゲナーゼの詳細な性質については十分に解明されていない。著者らはウサギ肝の細胞質画分にω-オキソ脂肪酸に特異性を示すアルデヒドデヒドロゲナーゼを見出している。本論文ではこのアルデヒドデヒドロゲナーゼのウサギ肝の細胞質画分精製、これをコードするcDNAのクローニングとその大腸菌内での発現について報告する。12-oxo lauric acidに特異性を示すAldDHをSDS-PAGEで分子量50 kDaの位置に単一バンドを示す標品にまで精製した。また、500アミノ酸残基からなるアミノ酸配列をもつタンパク質をコードするcDNAをウサギ肝cDNAライブラリーよりクローニングした。cDNAの塩基配列から推定されるアミノ酸配列はヒト由来のレチナールデヒドロゲナーゼと約90%の相同性を有していた。細胞質から精製されたAldDH (AldDH-C)と大腸菌内で発現させたAldDH (AldDH-R)の酵素標品は、ともにω-オキソ脂肪酸を基質として認識し、アルデヒドデヒドロゲナーゼ活性を示した。抗AldDH-R抗体はウサギ肝細胞質の12-oxo lauric acidデヒドロゲナーゼ活性をAldDH-Rと同様の割合で阻害した。これらの結果は、脂肪酸ω-酸化経路においてこのAldDHが重要な役割を果たしていることを示唆している。 A part of fatty acids are metabolized to the shorter chain dicarboxylic acids via ω-oxidation and β-oxidation pathway. ω-Oxidation pathway is composed of three sequential steps catalyzed by ω-hydroxylase, alcohol dehydrogenase (AlcDH) and aldehyde dehydrogenase (AldDH), respectively. However, AldDH is not studied well in a view of ω-oxidation pathway. We found a novel AldDH specific for ω-oxo fatty acids in rabbit liver cytosolic fraction. This paper describes the purification of AldDH from rabbit cytosolic fraction, the cloning of a cDNA encoding the AldDH and its expression in E. coli. An AldDH specific for 12-oxo lauric acid was purified to a single band, which showed an apparent molecular weight of 50 kDa on SDS-PAGE. A cDNA (2.1 kbp) encoded a protein of 500 amino acids has been isolated from rabbit liver cDNA library. The amino acid sequence predicted from the cDNA showed 90% identity with that of human retinal dehyderogenase. Purified AldDH (AldDH-C) and AldDH expressed in E. coli (AldDH-R) recognize as substrates 16-oxo palmitic acid, 12-oxo lauric acid, 10-oxo capric acid, and 8-oxo caprylic acid. 12-oxo lauric acid dehydrogenase activity in rabbit liver cytosolic fraction was inhibited by an antibody against AldDH-R with a same manner of AlcDH-R. These results indicate that this AldDH is an essential enzyme in fatty acid ω-oxidation pathway. 2006-09 jpn departmental bulletin paper https://fukuyama-u.repo.nii.ac.jp/records/7514 AA11870542 福山大学生命工学部研究年報 Annual report of Faculty of Life Science and Biotechnology, Fukuyama University 5 1 10 https://fukuyama-u.repo.nii.ac.jp/record/7514/files/KJ00005782201.pdf application/pdf 707.4 kB 2006-09-01